液相色譜是一種常用的分析技術，其檢測結果的準確性和可靠性對于科研和工業生產都至關重要。以下是影響液相色譜檢測結果的因素：
1. 儀器相關因素
- 色譜柱：是液相色譜的核心部件，其類型、長度、內徑和粒徑等參數對分離效果有顯著影響。不同類型的色譜柱適用于不同的分析樣品，如 C18、C8、C4 和 C1 等不同相對極性的固定相柱可針對不同極性的物質進行有效分離。若色譜柱選擇不當，可能導致樣品中各組分無法全分離，影響檢測結果的準確性。此外，色譜柱的使用時間和狀態也會影響其性能，隨著使用次數的增加，柱效可能會逐漸降低，需定期進行維護和更換。
- 流動相：其組成包括溶劑、溶劑比例和緩沖劑等，對溶質的溶解度和出峰效果起著關鍵作用。溶劑的選擇要依據樣品的特性和分析目的，不同的溶劑對樣品的溶解能力和洗脫能力不同。溶劑比例的變化會直接影響色譜峰的形狀和保留時間，不適當的比例可能導致峰形拖尾、前沿或分裂等問題。緩沖劑的添加則會影響一些離子性物質的保留時間和分離度，對于需要控制溶液 pH 值的分析尤為重要。同時，流動相的純度和穩定性也需保證，雜質或波動可能干擾檢測結果。
- 檢測器：液相色譜儀的檢測器種類繁多，如紫外檢測器、熒光檢測器、二極管陣列檢測器和質譜儀等，不同的檢測器適用于不同類型的分析目標。選擇合適的檢測器需要考慮分析目標的特性以及預期的檢測靈敏度和選擇性。例如，紫外檢測器廣泛應用于定性和定量分析中，但對于不吸收紫外光的化合物則無法檢測；而質譜儀可以提供更詳細的分析結果，但操作和維護較為復雜。檢測器的靈敏度、穩定性和線性范圍等性能指標也會影響檢測結果的準確性。
- 進樣系統：進樣方式包括定量進樣和質量進樣，其選擇要根據分析目的和樣品性質來確定。進樣量的大小直接影響峰形的對稱性和峰高的穩定性，過小的進樣量可能導致信號噪聲比較高，過大的進樣量可能造成色譜峰的峰形畸變。此外，進樣的準確性和重復性也非常重要，否則會影響分析結果的可靠性。
2. 環境因素
- 溫度：液相色譜對溫度較為敏感，適宜的溫度是保障儀器正常運行和性能穩定的必要條件。一般來說，室溫應控制在 20℃-30℃之間，日溫度變化不宜太大，否則在開機分析時會影響色譜分離效果。夏季要特別注意控制室溫不要超過 30℃，溫度太高會使流路系統產生氣泡，進而影響檢測器的正常工作，如熒光檢測器等。此外，溫度的變化還可能影響流動相的粘度和溶解度，從而間接影響分離效果。
- 濕度：室內相對濕度應控制在 60%以下，濕度過高可能導致儀器受潮，影響電子元件的性能和壽命，還可能引起流動相的性質變化，如含水量增加等，進而影響檢測結果。
- 潔凈度：空氣中懸浮的顆粒物質會對色譜儀器分析帶來干擾，使本底和噪聲升高，成為分析測試的污染源，直接影響高純物質的純度與痕量雜質的分析。因此，實驗室要保持清潔，減少灰塵和雜質的產生。
3. 樣品因素
- 樣品制備：樣品的前處理過程對檢測結果有很大影響。如果樣品處理不當，如提取不全、凈化不干凈、衍生化反應不全等，會導致樣品中的目標成分含量不準確或存在干擾物質，從而影響檢測結果的準確性。此外，樣品的穩定性也很重要，有些樣品在儲存或處理過程中容易發生降解、聚合等反應，需要采取適當的措施加以防止。
- 樣品濃度：樣品濃度過高或過低都可能影響檢測結果。濃度過高可能會導致色譜柱過載，使峰形變形、保留時間改變，甚至損壞色譜柱；濃度過低則可能使檢測信號較弱，難以準確定量。因此，需要根據樣品的性質和分析要求，選擇合適的樣品濃度進行檢測。
4. 操作因素
- 操作人員：操作人員的技術水平和經驗對檢測結果也有重要影響。熟練的操作人員能夠正確操作儀器、選擇合適的分析方法和條件，并準確處理和分析數據。而不熟練的人員可能會因操作不當導致儀器故障、樣品損失或數據分析錯誤等問題。因此，操作人員需要經過專業的培訓和實踐，掌握液相色譜的原理、操作技巧和注意事項。
- 方法建立與優化：建立合適的液相色譜分析方法需要考慮多個因素，如樣品的性質、分析目的、儀器的性能等。在方法建立后，還需要進行優化，以提高分離效果、檢測靈敏度和準確性等。方法的優化包括調整流動相的組成、梯度洗脫程序、柱溫、流速等參數，以及選擇合適的檢測波長和進樣量等。
